细胞瞬转质粒/注意事项及优化❗

1️⃣提前24h铺板，使第二天密度为70-80%，细胞太多或太少都会影响转染效率 2️⃣铺板时一定要铺匀，使细胞均匀分布 3️⃣待转染的细胞状态一定要好，可在转染前使用XR-PTM培基替换原有培基，优化细胞状态 4️⃣配置转染复合物：用opti-MEM或无血清培基配置，➕质粒或Lipo8000后都需用枪轻轻混匀，无需室温孵育 5️⃣加入转染复合物之前须在6孔板中更换新鲜培基，lipo8000可用含双抗的培基 6️⃣将125μL转染复合物/孔均匀滴加至细胞中，轻轻摇匀，直接继续培养，无需换液 7️⃣转染24h后可提RNA，48-72h后可荧光显微镜下通过荧光观察转染效率或提蛋白跑WB进行验证 ⭐XR-PTM培基富含脂质、胰岛素、维生素、微量元素、转铁蛋白等，主要用于转染前细胞状态优化，🉑提高细胞转染效率，直接在消化铺板时替换原有培基使用，转染效率真的大大提高了（见图6-7）😎 如果一直苦恼于细胞转染效率问题，可以试试更换转染前培基，真的效果很nice😌