LoadingBuffer中各成分的作用是什么❓

粉衣小女孩 2024-07-06 16:03:20
1️⃣LoadingBuffer的主要成分有:Tris-HCl(pH6.8)、SDS、Glycerol (甘油)、Bromophenol blue(溴酚蓝)、DTT(二硫苏糖醇)、β-ME(β-巯基乙醇) 2️⃣各成分的作用 Tris:维持体系pH 在 6.8 左右,防止在低温保存的过程中蛋白质肽键断裂,维持蛋白质的稳定性;抑制酶促反应,防止蛋白酶降解蛋白质 SDS:破坏保持蛋白质二级和三级结构的氢键,可以覆盖蛋白质本身的电荷,使蛋白质净负电荷,同时与硫醇试剂一起维持蛋白质的一二级结构。 甘油:增加样品密度,确保样品下沉到上样孔底部 β-巯基乙醇和DTT:用于抑制或破坏含硫氨基酸(如半胱氨酸)之间产生的二硫键 溴酚蓝:有色染色示踪电泳进程 ⭐ 由于β-巯基乙醇及DTT有毒且有刺鼻性气味,亲和生命即沉Loading Buffer采用新型还原剂复合配方,替代了DTT和β-ME,可高效还原二硫键,破坏蛋白质的空间结构,同时也避免了DTT和β-ME的毒性及臭味,而且上样丝滑,沉降速度快👏🏻试用装领取👉🏻

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评论列表

七

2
2024-07-06 17:56

显色啊

解语怂怂

解语怂怂

1
2024-07-06 17:40

谁敢想啊 我曾经自己配过loading buffer 好大一瓶放在实验室 感觉好多年都用不完 不过现在已经不用这玩意儿了[doge]

一口好牙

一口好牙

1
2024-07-06 18:46

有配方吗