LoadingBuffer中各成分的作用是什么❓
粉衣小女孩
2024-07-06 16:03:20
1️⃣LoadingBuffer的主要成分有:Tris-HCl(pH6.8)、SDS、Glycerol (甘油)、Bromophenol blue(溴酚蓝)、DTT(二硫苏糖醇)、β-ME(β-巯基乙醇)
2️⃣各成分的作用
Tris:维持体系pH 在 6.8 左右,防止在低温保存的过程中蛋白质肽键断裂,维持蛋白质的稳定性;抑制酶促反应,防止蛋白酶降解蛋白质
SDS:破坏保持蛋白质二级和三级结构的氢键,可以覆盖蛋白质本身的电荷,使蛋白质净负电荷,同时与硫醇试剂一起维持蛋白质的一二级结构。
甘油:增加样品密度,确保样品下沉到上样孔底部
β-巯基乙醇和DTT:用于抑制或破坏含硫氨基酸(如半胱氨酸)之间产生的二硫键
溴酚蓝:有色染色示踪电泳进程
⭐ 由于β-巯基乙醇及DTT有毒且有刺鼻性气味,亲和生命即沉Loading Buffer采用新型还原剂复合配方,替代了DTT和β-ME,可高效还原二硫键,破坏蛋白质的空间结构,同时也避免了DTT和β-ME的毒性及臭味,而且上样丝滑,沉降速度快👏🏻试用装领取👉🏻
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七
显色啊
解语怂怂
谁敢想啊 我曾经自己配过loading buffer 好大一瓶放在实验室 感觉好多年都用不完 不过现在已经不用这玩意儿了[doge]
一口好牙
有配方吗