手把手教你细胞冻存❗（提高复苏存活率～）

复苏后的细胞状态差存活率低大概率是没冻存好❗今天说一下冻存细胞比较关键的几点～ 1️⃣冻存的细胞状态一定要好，无污染，尽量选前几代冻存。 看细胞活率，死细胞较多则细胞状态差，（悬浮细胞）活细胞透亮有光泽，死细胞暗淡无光且膜碎裂，（贴壁细胞）活细胞可贴壁且膜完整，死细胞不能贴壁；看细胞形态是否正常，可在ATCC官网🔎该细胞正常形态；无污染，细胞间隙干净，无黑点，培基清澈无浑浊 2️⃣不能消化过度，消化过度非常影响细胞状态。 消化时镜下观察，细胞变圆，用手轻拍侧壁后呈流沙状脱落即可终止消化，⚠️胰酶刚开封的时候和用到瓶底的消化效果不一样（亲测刚开封时消化能力强一些），所以要常观察，避免消化过度 3️⃣冻存时注意无菌操作。 由于冻存管较小，直接用手开关盖可能会碰到管口导致污染，用长镊子操作可避免～ 4️⃣不同的冻存液冻存程序不同。 DMSO➕血清冻存液：DMSO加入血清是会产热，一定要提前配好预冷，不可现配现用；梯度冻存盒一定要提前拿出来恢复至室温～ 无血清冻存液：无需使用梯度冻存盒，直接放入-80℃冰箱即可；无需配置，直接使用即可，更方便；前段时间申请了逸漠生物无血清冻存液试用装，最近复苏了冻的细胞，存活率很高（如图7）❗ 🌿🌿替大家试过了，逸漠生物无血清冻存液冻存的细胞复苏后存活率很好，👉🏻现在申请试用装即可获得帆布包和钥匙扣哦[doge]冲冲冲❗