质粒提取超详细教程🤏🏻

⚠️充分重悬细胞颗粒是获得良好产率的关键，推荐涡旋重悬；一般一管菌液加500μLSolution Ⅰ即可，我这里菌比较多所以分成两管提（裂解更充分） ⚠️加入500μL solution Ⅱ后，避免剧烈混合，会剪切染色体DNA导致质粒浓度降低，裂解反应不超过5min；solution Ⅱ不使用时盖紧，避免空气中CO2的酸化 ⚠️空甩离心柱2min➕取出离心柱开盖晾干，是为了去除无水乙醇，不晾干会使A260/230值降低 ✅洗脱缓存液或水的PH值要在8.0-9.0之间，所以用试剂盒里配套的洗脱液的洗脱效率是最佳的；如果质粒浓度较低可将质粒溶液加到离心柱进行二次洗脱～ ✅摇菌我一般用比克曼的50mL离心管，刻度清晰，装倒液体都能很清楚的看到，LB培养基直接倒至20mL刻度线那里，很方便，平时用来量液体体积也很好（配梯度酒精超方便），而且比克曼的50mL离心管可以耐受13000g的离心力，而且无菌无酶，可直接使用，适用于很多实验～