快速WB实验完整步骤❗（超详细～）
粉衣小女孩
2025-05-28 15:01:11
详细步骤在图文中已展示，下面说一下注意事项及小tips~
1️⃣蛋白提取：提好蛋白是做好wb实验的第一步，全程要在冰上进行，速度尽量快一些，裂解液一定要加蛋白酶抑制剂，也可以选用已经加好蛋白酶抑制剂的裂解液产品，我用的是亲和生命的，之前分享过～2️⃣电泳：按算好的上样体积（30μg/浓度）进行点样，上样体积相差过大（泳道之间容易挤压）可以用1×loading补齐；亲和快速电泳液搭配快速胶，300V跑20min即可完成电泳😎
3️⃣转膜：转膜操作前将要用到的器皿都过一下纯水，用快速转膜液400mA转20-30min即可，分子量大可延长时间～
4️⃣封闭：转膜后用10-15mL快速封闭液孵育5-10min即可（常温慢摇）
之前用传统方法做wb实验时间很长，亲和生命的快速试剂用了大半年了，真的大大提高了实验效率，结果也是稳稳的～😌
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